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馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA培養(yǎng)基）

有效期 3年

BR

別名 PDA

英文名稱 Potato Dextrose Agar

儲(chǔ)存條件 RT

單位 瓶

PDA培養(yǎng)基用途：用于霉菌，酵母菌計(jì)數(shù)（GB/SN標(biāo)準(zhǔn)）

成分（g/L）

馬鈴薯粉  　      6.0g

葡萄糖               20.0g

瓊脂                  20.0g

PH值  5.4-5.8

用 法：稱取本品 46.0克，加入1000ml蒸餾水中，115℃高壓滅菌20分鐘備用。

注意事項(xiàng)：若所檢樣品細(xì)菌含量較低，則培養(yǎng)基無(wú)需添加氯霉素；若所檢樣品細(xì)菌含量較高，則傾注平板前每升培養(yǎng)基中需添加過(guò)濾除菌的氯霉素100mg。

 PDA培養(yǎng)基又稱馬鈴薯葡萄糖瓊脂，PDA培養(yǎng)基一種常用的培養(yǎng)基，宜培養(yǎng)酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。屬于固體培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基。以下是關(guān)于PDA培養(yǎng)基的制備方法。
PDA培養(yǎng)基的制備：
(1)稱量和熬煮 按培養(yǎng)基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中，加水1000ml，在加熱器上加熱沸騰，維持20-30min，用可用2層紗布趁熱在量杯上過(guò)濾，濾渣棄取。濾液補(bǔ)充水分到1000ml。
(2)加熱溶解 把濾液放入鍋中，加入葡萄糖20g，瓊脂15～20g(提前搞碎)，然后放在石棉網(wǎng)上，小火加熱，并用玻棒不斷攪拌，以防瓊脂糊底或溢出，待瓊脂*溶解后，再補(bǔ)充水分所需量。
(3)分裝 按實(shí)訓(xùn)要求，將配制的培養(yǎng)基分裝入試管或500ml三角瓶?jī)?nèi)。分裝時(shí)可用三角漏斗以免使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上造成污染。 分裝量：固體培養(yǎng)基約為試管高度的1/5，滅菌后制成斜面，分裝入三角瓶?jī)?nèi)以不超過(guò)其容積的一半為宜;半固體培養(yǎng)基以試管高度的1/3為宜，滅菌后垂直待凝。
(4)加棉塞 培養(yǎng)基分裝完畢后，在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或試管帽等)，以阻止外界微生物進(jìn)入培養(yǎng)基內(nèi)造成污染，并保證有良好的通氣性能。
(5)包扎 加塞后，將全部試管用麻繩或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一層牛皮紙，以防止滅菌時(shí)冷凝水潤(rùn)濕棉塞，其外再用一道線繩或橡皮筋扎好，用記號(hào)筆注明培養(yǎng)基名稱、組別、配制日期。
PDA培養(yǎng)基的制備需要注意以下幾點(diǎn)：
1.培養(yǎng)基經(jīng)滅菌后，必須放在37C溫箱培養(yǎng)24h，無(wú)菌生長(zhǎng)者方可使用。
2.PDA培養(yǎng)基一般不需要調(diào)pH。對(duì)于要調(diào)節(jié)pH的培養(yǎng)基，一般用pH試紙測(cè)定其pH。如果培養(yǎng)基偏酸或偏堿時(shí)，可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液進(jìn)行調(diào)節(jié)。調(diào)節(jié)時(shí)應(yīng)逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部過(guò)酸或過(guò)堿破壞培養(yǎng)基成分。
3.培養(yǎng)基在使用時(shí)也可以做成不含瓊脂的液體培養(yǎng)基，用于菌類(lèi)的震蕩培養(yǎng)。
4.培養(yǎng)基也可以加入氯霉素或土霉素，加入量為0.2g/L培養(yǎng)基，主要是為了抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)，減少干擾性。

參考文獻(xiàn)：

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馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA培養(yǎng)基）