LB培養(yǎng)基是微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的培養(yǎng)基，用于培養(yǎng)大腸桿菌等細(xì)菌。其分為液態(tài)或是加入瓊脂制成的固態(tài)培養(yǎng)基。早LB培養(yǎng)基中加入抗生素還可用于大腸桿菌為宿主的克隆。LB一般被解釋為Luria-Bertani培養(yǎng)基,然而根據(jù)其發(fā)明人貝爾塔尼(Giuseppe Bertani)的說法,這個名字來源於英語的lysogeny broth,即溶菌肉湯。
LB培養(yǎng)基的配置：
成分：
胰蛋白胨(tryptone)10g；
酵母提取物(yeast extract)5g；
氯化鈉(NaCl)10g；
配制方法：
（1）稱量 分別稱取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl，置于燒杯中；
（2）溶化 加入所需水量2/3的蒸餾水于燒杯中，用玻棒攪拌，使藥品全部溶化；
（3）調(diào)pH 用1mol/L NaOH溶液調(diào)pH7.2；
（4）定容 將溶液倒入量筒中，加水所需體積；
（5）加瓊脂 加入所需量瓊脂，加熱融化，補(bǔ)足失水；
（6）分裝、加塞、包扎；
（7）高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min；
固體培養(yǎng)基另加 瓊脂粉 15-20g；
LB固體培養(yǎng)基1L和液體一樣，加10g~15g瓊脂粉，一定要在溫度降下之前加好抗生素，并且倒好板。
LB固體培養(yǎng)基倒板：
1、配制：100mlLB培養(yǎng)基加入1~1.5g瓊脂粉
2、抗生素的加入：高壓滅菌后，將融化的LB固體培養(yǎng)基置于55℃的水浴中，待培養(yǎng)基溫度降到55℃時（手可觸摸）加入抗生素，以免溫度過高導(dǎo)致抗生素失效，并充分搖勻。
3、倒板：一般15ml-20ml倒1個板子。培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿后，打開蓋子，在紫外下照10-15分鐘。
4、保存：用封口膠封邊，并倒置放于4℃保存，一個月內(nèi)使用。
LB培養(yǎng)基優(yōu)點(diǎn)：
LB培養(yǎng)基由蛋白胨、酵母膏、nacl組成。先,蛋白胨是經(jīng)過胰酶處理過的蛋白，處理后,大分子的蛋白分子量變小，細(xì)菌更容易利用。此外，還含有嘌呤，提供生長因子。如要培養(yǎng)大腸桿菌，其實(shí)用普通蛋白胨代替胰蛋白胨是沒有問題的。蛋白胨為細(xì)菌的生長提供氮源。其次培養(yǎng)基中的酵母膏酵母提取物主要成分是氨基酸、小肽、核甘酸、b族維生素、主要為細(xì)菌提供維生素和微量元素，是細(xì)菌生長所必須的.氯化鈉在培養(yǎng)基中的作用是維持滲透壓,兼能可提供無機(jī)鹽。
LB培養(yǎng)基與瓊脂培養(yǎng)基之間的兩大區(qū)別：
區(qū)別一：瓊脂培養(yǎng)基就是加了瓊脂粉凝結(jié)成固體的LB培養(yǎng)基。固體的培養(yǎng)基用于細(xì)菌涂板，抗性篩選挑選單克隆之用 液體的用于單克隆菌種擴(kuò)大培養(yǎng)，提取目的基因或者蛋白之用。
區(qū)別之二：就是LB培養(yǎng)基是液體的，而營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基)是固體 具體的配方問題—— LB培養(yǎng)基的配方如下:?胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L 酵母提取物(Yeast extract) 5g/L 氯化鈉(NaCl) 5g/L。另外根據(jù)經(jīng)驗(yàn)值用NaOH調(diào)節(jié)該培養(yǎng)基的pH,使其達(dá)到7.4，然后來培養(yǎng)E-coli。 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基配方： 牛肉膏 0.3g蛋白胨 1g 氯化鈉 0.5g 瓊脂 2g 自來水 100mL pH 7.0～7.2。
北京索萊寶科技有限公司常備貨產(chǎn)品LB固體培養(yǎng)基（干粉）和LB液體培養(yǎng)基（干粉），貨號為L1015和L1010。LB培養(yǎng)基是分子生物學(xué)中常用的一種培養(yǎng)基，用于細(xì)菌培養(yǎng)。本公司所生產(chǎn)的LB培養(yǎng)基原料，NaCl為國產(chǎn)分析純，胰化蛋白胨及酵母粉為進(jìn)口OXOID，酵母粉為日本進(jìn)口原材料，經(jīng)充分混勻得所。
版權(quán)所有 ICP備案號: 管理登陸 技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 總流量：1132809 網(wǎng)站地圖
